Das 7-alpha-Hydroxy-4-cholesten-3-on ist ein Intermediat in der Synthese von Cholesterol. Es wiederspiegelt die Aktivität der Gallensäure-Synthese. Eine Erhöhung der 7-alpha-Hydroxy-4-cholesten-3-on spricht für Gallensäure-Malabsorption und folglichem Gallensäure-Verlust in das Kolon. Dort führt die erhöhte Sekretion von Wasser und Elektrolyten zur Diarrhoe. Auslöser können das Kurzdarmsyndrom, Reizdarmsyndrom, Mikroskopische Kolitis und morbus Crohn.

Die Vorteile der Diagnostik einer Gallensäuremalabsorption sind das Vermeiden mehrtägiger Stuhlsammlungen oder die Abgabe von radioaktiv markierter Gallensäure (SeHCAT).

Die Konzentrationen unterliegen einem starken zirkadianen Rhythmus.